Autoinmunidad

• Es significativa la cuantificación en el test nDNA?

Sí. El título de anticuerpos anti –nDNA es directamente proporcional a la actividad (Lupus Eritomatoso Sistémico). Por lo tanto la cuantificación de este antígeno se usa para predecir exacerbación o para adaptar el tratamiento médico.

En general, se utiliza para detectar e identificar la entidad antigénica, la especificidad o el tipo de patrón. La información obtenida en el test ANA (Anticuerpos Anti-Nucleares) sobre células HEp-2 se considera significativa a títulos altos. Sin embargo, el valor del título no tiene una correspondencia directa ni con la severidad de la enfermedad ni con su prognosis, por lo que, una vez está clara la especificidad, no se utiliza de forma habitual con el propósito de cuantificación.

• ¿Puede estandarizarse la técnica de inmunofluorescencia?

La técnica de inmunofluorescencia (IFA) es de difícil estandarización debido a diversos factores: el origen biológico del sustrato utilizado, el proceso en si mismo y la lectura e interpretación subjetiva de los patrones obtenidos.
Sin embargo, recientemente se están introduciendo de forma significativa algunas herramientas que sin duda ayudan a normalizar y estandarizar la IFA. En primer lugar, el uso de sistemas automáticos de preparación de portas mejora la reproducibilidad en la etapa de dilución, incubación y lavado, minimizando al mismo tiempo errores de identificación de muestras.
En cuanto a los reactivos, se recomienda trabajar con reactivos de trazabilidad asegurada, tanto a nivel de sustrato (cumplimiento de la Directiva EC 95/78,  adopción de un sistema de calidad ISO 13485 por el fabricante, trazabilidad de la fabricación) como de los conjugados utilizados como marcadores, por ejemplo asegurando su trazabilidad a los conjugados de referencia de la OMS.
En la etapa de lectura, la recomendación es utilizar microscopios que posean fuentes de iluminación de alta intensidad y estables a lo largo del tiempo (lámparas basadas en LED). Este punto ha sido considerado muy especialmente como la piedra angular del proceso ya que permitirá la comparación de resultados de una forma más objetiva e independiente de las condiciones de observación.
Por último, respecto a la interpretación de los patrones de fluorescencia reactivos, hay diversas iniciativas tanto a nivel internacional (EASI) como a nivel local a través de las diferentes sociedades científicas de unificar la nomenclatura y clasificación de los diferentes resultados que pueden obtenerse. Este trabajo se ve reforzado con la implementación de programas de calidad externo como parte de la actividad propia del laboratorio.

• Para qué se utilizan las improntas de riñón de rata con médula renal ?

La impronta con corteza y médula es útil para diferenciar Anticuerpos antimitocondriales (AMA) de Anticuerpos de tipo LKM. Los AMA (M1, M2 y M5) reconocen el citoplasma de las células de los túbulos renales, tanto los proximales como los distales (estos últimos, más intensos para M1 y M2). Los LKM, reaccionan solamente con los túbulos proximales. En la corteza renal hay túmulos proximales y distales, mientras que en la médula hay solo proximales. Por lo tanto los AMA marcan la corteza (proximales y distales) mientras que los LKM solo marcan la corteza. Para éstos Ac es muy evidente y característico el  contraste entre corteza y médula renales.

• Qué diferencias de resultados se pueden obtener en microscópio con lámpara de mercurio ó lámpara halógena ?

• Se puede diagnosticar la Enfermedad Celíaca con conjugado IgG ?

La Enfermedad celíaca es una patología de las mucosas, debido a esto está asociada a Anticuerpos IgA. Los Anticuerpos IgG sólo son empleados en casos de deficiencia congénita de IgA. Debido a la elevada prevalencia de deficiencia de IgA en enfermos celíacos comparada con la población normal (ya a que se detecta en un alto porcentaje en niños) siempre es recomendable verificar primero la deficiencia de IgA.

• Qué ventajas tiene una dilución de 1/80 vs 1/40 en Hep-2 ?

En muchos países, un título de 1/40 no tiene significado clínico ya que entre 5 – 10 % de Población adulta sana presenta autoanticuerpos de manera natural sin sufrir ninguna enfermedad. Esta baja especificidad para las enfermedades del tejido conectivo se mejora  al emplear un valor discriminante mayor, que en éste tipo de análisis viene dado por la dilución de la muestra ( por ejemplo 1/80). De éste modo los positivos a 1/80 tienen una mayor relevancia desde el punto de vista diagnóstico. Esta regla se sigue de manera oficial por sociedades de bioquímica en países como Italia y España.

• Cuál es la diferencia entre esófago y endomisio de mono de Biosystems ?

Biosystems comercializa los cortes de esófago de mono para diferentes patologías. Esófago de tercio superior para Pénfigo y Penfigoide (enfermedades de la piel) y Endomisio para diagnóstico de Enfermedad Celíaca que no es ni más ni menos que Esófago distal ó tercio inferior que tiene tejido endomisial en gran cantidad lo que Facilita la visualización de la imagen de los Ac. Anti endomisio.

• Por qué se prefiere hacer FAN en Hep-2 antes que en hígado de rata ?

En las improntas de Hígado de rata no se pueden observar las imágenes que ocurren cuando las células están en división debido a que es un tejido. En las improntas de Hep-2, al ser células que se las hace crecer en monocapa y se detiene su crecimiento en un momento determinado, habrá células en diferentes estadíos de maduración por lo que se encontrarán células en división, necesarias para evaluar FAN.